碱性成纤维细胞生长因子（bFGF），属于成纤维细胞生长因子家族，通过结合并激活靶细胞表面的受体触发一系列信号转导通路。bFGF 可以影响多种细胞的增殖，包括内皮细胞、神经元、软骨细胞、平滑肌细胞、黑素细胞和脂肪细胞。此外，bFGF参与各种生物过程，包括细胞的自我更新、分化、发育、组织修复和再生。作为细胞生长的关键因子，bFGF被广泛应用于多种细胞的体外培养。
研究表明，bFGF在生理条件下不稳定，在哺乳动物细胞培养条件下的半衰期约为8小时。由bFGF低热稳定性与较短半衰期导致细胞生长出现的问题，需要通过在培养过程中补充生长因子，或者每天更换培养基来解决。在天然bFGF基础上改良得到的bFGF蛋白（耐热型）解决了这一难题。它在保留了天然bFGF强大生物学活性的同时，显著提升了热稳定性，可耐受更高温度，在较为宽泛的温度区间内保持分子结构、维持蛋白活性。
人胚胎干细胞（hESC）和诱导性多能干细胞（iPSC）具有分化为所有体细胞类型的潜能。在体外培养hESC和iPSC的过程中，bFGF对于维持干细胞的多能性必不可少。研究发现，添加bFGF蛋白（耐热型）培养的hESC能够以更快的速度形成未分化的细胞克�。ㄍ�1A），且在长期培养那个过程中提高了细胞的增殖速度（图1B）。深入研究发现，bFGF蛋白（耐热型）能够在积极影响hESC增殖速度的同时，维持多OCT4、SOX2、KLF4等多种干性标记物的表达，说明其能够保持hESC的多能性，这对bFGF蛋白（耐热型）在细胞培养领域的应用至关重要。
图1 bFGF蛋白耐热型与野生型对hESC细胞增殖的影响（DOI: 10.3390/biology12060888）
A：无饲养层培养条件下，使用不同类型bFGF蛋白时，hESC第2天的生长情况。B：无饲养层培养条件下，使用不同类型bFGF蛋白连续培养，细胞生长率的比较。WT-bFGF：bFGF蛋白野生型。TS-bFGF：bFGF蛋白耐热型。
竞技宝官网推出：重组人bFGF蛋白（耐热型）
产品特点：耐热性好、高纯度、高活性、低内毒素、无菌、无支原体。
产品性能：
图2 在还原条件下，重组人bFGF蛋白耐热型的SDS-PAGE纯度大于90%
图3 将100ng/mL的竞品和T&L产品分别放至37℃，72小时后进行活性检测，T&L产品活性为竞品的6倍左右。
图4 将100ng/mL的竞品和T&L产品分别放到-80℃、4℃和37℃，72小时后进行活性检测。竞品的活性随着放置温度升高逐渐降低，而T&L产品在不同放置温度下，活性无明显变化。
添加在iPSC培养基中，可每2天换液一次。
如图5所示，分别将竞技宝官网重组人bFGF蛋白（GMP-TL901）、重组人bFGF蛋白（耐热型）应用到AMMS?多能干细胞培养基（AS-35）中培养iPSC。添加bFGF蛋白（耐热型）的培养基中，每天换液或隔天换液组，细胞的克隆数目、克隆团大小相较添加普通型蛋白组均有明显提升。然而，添加耐热型蛋白后，隔天换液与每天换液的方案之间细胞状态相差不大。因此，竞技宝官网的bFGF蛋白（耐热型）可以适配iPSC隔天换液的培养方案。
图5 将bFGF蛋白普通型或耐热型添加到iPSC培养体系中，不同培养方案对iPSC细胞克隆团形成的影响比较。
参考文献
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